【摘要】目的 探讨富半胱氨酸蛋白61、雌激素受体与孕激素受体在子宫肌瘤中的各自表达情况和相互关系,为明确子宫肌瘤病因提供科学依据。方法 选取入院治疗子宫肌瘤并行全切术的45例患者作为试验组,采用免疫组织化学法,检测CYR61、ER、PR在子宫全切标本肌瘤组织中的表达,对照组为相应样本的非瘤平滑肌正常组织。结果 ER和PR在子宫全切标本肌瘤组织中的表达明显高于对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01);PR的表达水平高于ER,差异有显著统计学意义(P<0.01);CYR61在子宫全切标本肌瘤组织中的表达明显低于对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论 CYR61、ER和PR表达与子宫肌瘤的发生有密切关系,三者及其相互作用可能是促进子宫肌瘤继续发展的重要因素。
【关键词】子宫肌瘤;富半胱氨酸蛋白61;雌激素受体;孕激素受体
子宫肌瘤(uterine leiomyoma,UL)是一种常见的女性生殖系统的良性肿瘤,由子宫平滑肌细胞增生而成,也包含少量结缔组织纤维,在我国近年来呈逐步上升的发病趋势,研究统计资料显示40~50岁发病人群居多,约为52.2% ~60.0%,因2/3的患者可没有明显症状,少数临床表现为阴道出血、腹部可触及肿物以及压迫症状等,临床的统计远远低于实际患病率人数。子宫肌瘤的发病机制尚不明确,目前研究认为在子宫肌瘤生长过程中,依赖激素水平,雌激素和孕激素作为子宫肌瘤生长的启动元件,主要为诱导转录、合成调节、分化蛋白质,在某些生长因子介导下促进平滑肌细胞的有丝分裂活性,这一作用主要通过雌激素和孕激素通过靶器官内雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptors,PR)起作用,富半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich 61,CYR61)具有明显的促进细胞有丝分裂活性和趋化性,广泛存在于人体多个器官和组织中,其众多生物学特性在肿瘤生长中有重要作用,对CYR61的研究有助于发现子宫肌瘤的发病机理。本研究旨在通过检测CYR61、ER、PR在子宫全切标本肌瘤组织中的表达并与非瘤平滑肌正常组织对比,及三者之间表达上的关系,探讨三者与子宫肌瘤发生的关系,为临床病因提供一定科学依据,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择笔者所在医院2011年9月 2012年3月收治子宫肌瘤并行切除术的45例患者,年龄38~51岁,平均(44.7±2.5)岁,月经规律,均为未绝经妇女,术前6个月未服用任何类固醇激素类药物,无其他疾病史,不伴有其他子宫良、恶性肿瘤,无其他内分泌综合征。肿瘤直径0.5~
1.2 方法
1.3 判定标准
光学显微镜(Olympus)下观察三组细胞样本的阳性情况,CYR61受体的阳性棕黄色颗粒主要位于胞浆内,ER、PR的阳性棕黄色颗粒主要位于细胞核内,综合染色强度及分布范围进行半定量处理。结果判定采用免疫组织化学评分(H-score)法,依照染色轻度不同分为4级:细胞浆或细胞核上未染色为0分,棕黄色由浅到深依次列为1、2、3分,满分为4分,随机选取5个高倍视野(×400)中进行着色细胞和未着色细胞的数目统计,每个标本计数1 000个细胞,分布范围评分标准:阳性细胞<10%计为0分;10%~30%为1分;31%~60%为2分,>60%为3分;上述两种评分相加:(-)0~1分;(+)2分;(++)3~4分;(+++)5~6分。阳性率=(阳性例数/总例数)×100% 。
1.4 统计学处理
采用SPSS 15.0统计学软件对数据分析,两组等级资料采用Wann-whitney检验进行比较,采用Spearman进行等级相关性分析,P<0.05为差异有统计学意义,P<0.01为差异有显著统计学意义。
2 结果
依据CYR61受体的阳性棕黄色颗粒主要位于胞浆内,ER、PR的阳性棕黄色颗粒主要位于细胞核内,阳性表达强弱依次为:(+++)强阳性,(++)阳性,(+)弱阳性,(-)阴性。分别将实验组CYR61、ER、PR在宫肌瘤和相应肌层的表达阳性率与对照组对比得出:ER在实验组阳性率明显高于对照组,差异有显著统计学意义(P< 0.01),见表1。PR在实验组阳性率明显高于对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01),见表2。CYR61在实验组阳性率明显低于对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01),见表3。
3 讨论
近年来,随着分子生物学研究的发展,许多相关研究指出,子宫肌瘤的发生于遗传因素有关,细胞遗传学显示20%~50% 的子宫肌瘤存在遗传异常,分子生物学研究显示子宫肌瘤由单克隆平滑肌细胞增殖而成,多发性子宫肌瘤由不同克隆细胞形成。近年来各国临床上对雌、孕激素与子宫肌瘤生长之间的关系研究不断深入,提示子宫肌瘤是激素水平依赖性肿瘤,需要两种激素共同协同作用生长,雌激素首先与ER受体结合,诱导肌瘤细胞表皮生长因子EGF-R的表达,促进PCNA表达;孕激素也同样先与PR结合,诱导肌瘤细胞产生大量上皮生长因子EGF样蛋白,促进细胞增殖。CYR61是CCN基因家族中最新发现的一员,家族成员结构相似,均含有富半胱氨酸,编码CYR61蛋白,利用自身明显促细胞分裂活性的特征,通过促进细胞生长、血管形成和维持肿瘤体供血来影响肿瘤的发生于发展。CYR61基因与细胞间的通讯有密切关系,人类的CYR61基因表达下调可能是肿瘤发生的一个重要原因。
本研究结果显示,45例实验患者的子宫肌瘤中ER和PR的水平均显著高于对照组(P<0.01),ER在子宫肌瘤和相应肌层的表达阳性率高达95.56%,PR在子宫肌瘤和相应肌层的表达阳性率高达97.78%,符合包玲燕等的报道结果。PR的表达高于ER,当子宫肌瘤细胞内ER异常性增多时可显著增加子宫肌瘤组织对雌激素的亲和力,肌瘤细胞显著增生,临床上的抗激素药物通过与ER配体结合区结合后阻止雌激素的这种作用,最终达到治疗的目的。测得子宫肌瘤组织中ER和PR表达说明良性子宫肌瘤相当完整保留了正常子宫肌瘤组织中ER和PR的特性,子宫肌瘤的发生发展与雌孕激素水平关系密切。本研究中CYR61在子宫肌瘤和相应肌层中都有表达,但其在正常子宫肌瘤组织中的表达高于在肌瘤组织中的表达,但阳性率程度明显低于ER和PR的水平,提示CYR61可能与子宫肌瘤发病有关,肌瘤组织中的阳性率的减弱,可能是其通过抑制肌瘤细胞凋亡,促进细胞过度增殖。本研究中,子宫肌细胞和肌瘤细胞中CYR61的表达与ER、PR之间的相关陛不明确,及细胞内的早期雌激素可以上调CYR61的表达,但本研究的标本不区分增殖期和分泌期,因而未检测到三者之间的调节作用关系。
子宫肌瘤的发病是多因素的,目前的临床治疗主要以手术切除为主,药物治疗因副作用大、停药后复发率高而受限,通过对CYR61、ER和PR在子宫肌瘤组织和正常平滑肌组织中表达水平及三者间相互作用的研究,为病情的发展发生提供科学依据,更好地预防子宫肌瘤的发生,对患者术后处理提供一定帮助,为应用新方法治疗和控制病情发展展示新的思路。
(贾婉秋,富半胱氨酸蛋白61与雌激素受体、孕激素受体在子宫肌瘤中的表达差异[J]中国医药科学2012年7月第2卷第13期:35、36、40)