周倩珺,叶艳娜,李婵,黎普茜,李栩萍,蒋敏桥
(广东省东莞市人民医院,广东东莞523018)
(安徽医药2012年9月:1308-1309)
【摘要】目的 检测FGF2蛋白在子宫内膜异位症(EMs)患者及非内异症患者腹腔冲洗液中的表达,探讨其在EMs发生、发展中的作用。方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测45例子宫内异症患者(EMs组)及4o例非内异症患者(对照组)腹腔冲洗液中FGF2水平。结果 (1)在EMs组中,FGF2水平分别为(126.67±39.26)ng·L-1,均高于对照组的(50.31±27.33)ng·L-1,差异具有显著性(P<0.01);(2)在EMs组中,III~IV期患者的FGF2水平为(118.75±45.81)ng·L-1,高于I~II期患者的(90.43±22.05)ng·L-1(P<0.05)。结论 腹腔冲洗液中FGF2增加可能与EMs发病及发展有关。
【关键词】FGF2;子宫内膜异位症;腹腔冲洗液;酶联免疫吸附试验
越来越多的证据表明,子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)患者与正常人子宫内膜存在许多不同之处,表现为内异症患者的子宫内膜细胞黏附、侵袭和血管形成能力明显增强,使之具有异位种植和生长的能力。成纤维细胞生长因子2(Fibroblast Growth Factor 2,FGF2)是人成纤维细胞生长因子(FGFs)家族中的一员,FGF2在细胞的增殖、黏附、血管生成等过程中起着十分重要的作用。本研究拟通过检测EMS患者及正常人腹腔冲洗液中FGF2的表达,探讨FGF2在EMS发生及发展中的作用。
1 材料与方法
1.1 研究对象 EMs组:选取2011年4月~2012年2月期间在本院经妇科手术并经病理证实的子宫内膜异位症患者45例。年龄30~45岁,平均年龄42.5岁。运用美国生殖学会子宫内膜异位症分期方法(r-AFS)分期,其中I~II期21例,III ~IV期为24例。对照组:收集同期因卵巢单纯性囊肿(18例)、子宫肌瘤(10例)及不孕症(12例)行腹腔镜手术治疗的非EMs患者共40例为对照组,患者年龄28~41岁,平均年龄38岁。所有妇女月经周期规则,术前6个月无甾体类激素治疗史,并排除了内分泌、肿瘤、急性感染等急慢性疾病。
1.2 试剂 人FGF2定量ELISA试剂盒购自北京晶美生物工程有限公司。
1.3 标本处理 进腹后用无菌吸管吸取生理盐水20 ml注入盆腔,无菌注射器于子宫直肠陷窝抽吸腹腔冲洗液约4~5ml。立即将腹腔冲洗液置于无菌EP管内,低温下3000 r·min 离心10 min,再收集上清液放人无菌EP管中,置于
1.4 检验方法 酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测人腹腔冲洗液中FGF2蛋白水平,具体操作方法严格按照试剂盒说明进行。
1.5 统计学方法 观测数据为计量数据,用x±s表示,各组间比较采用t检验,使用SPSS 13.0统计学软件进行分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者腹腔冲洗液中FGF2浓度 EMs组腹腔冲洗液中FGF2水平达(126.67±39.26) ng·L-1,显著高于对照组的(50.
2.2 FGF2与期别及r-AFS评分的关系EMs组中,III~IV期FGF2水平为(118.75±45.81)ng·L-1,明显高于I~II期的(90.43±22.05)ng·L-1(t=4.08,P<0.01),见表2。
3 讨论
3.1 FGF2的结构及功能 人源性FGF2基因定位于4q26~27,全长71.53 Kb,有3个外显子和2个内含子,mRNA全长67.74 Kb,FGF2是参与血管化调控的主要生长因子,可维持血管内皮细胞的存活和增殖,其在细胞的增殖、分化、黏附、血管生成等中起着十分重要的作用。FGF2基因敲除的小鼠表现出血管紧张度缺陷、创伤愈合过程中内皮细胞的迁移受到抑制、创伤愈合延迟等现象,表明FGF2通过控制内皮细胞的增生和迁移来调节血管形成。
3.2 FGF2与EMS的关系 子宫内膜异位症意指当具有生长功能的子宫内膜组织(腺体和间质)出现在子宫体以外的身体其他部位时称子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)。本病具有种植生长、侵袭、远处转移和易复发等类似恶性肿瘤的特点。EMs的病因复杂,发病机理仍不十分清楚。最近的研究表明,EMs的存在与病灶内的血管形成与生长紧密相关。
Zhao等研究发现FGF2相关结合受体与子宫内膜异位症无明显相关性。而本实验ELISA实验结果则提示EMs组腹腔冲洗液中FGF2水平较对照组显著为高,与Bourlev等研究结果类似,且随着疾病严重程度增加FGF2水平的升高更为显著。据此认为FGF2与EMs的发生发展有关。推测其可能机制为:返流入盆腔的异位内膜细胞及腹膜间皮细胞分泌FGF2聚集在腹腔内,FGF2作为一种血管化调控的主要生长因子,可促使盆腔异位内膜基底部毛细血管的数量和面积明显增加,使异位子宫内膜得以生长、增生和分化;同时,腹腔内FGF2的过表达还可募集中性粒细胞汇聚于异位灶,这些炎性细胞分泌的多种炎症因子及生长因子,反过来刺激腹膜间皮细胞及异位内膜细胞再分泌FGF2,加剧了异位症的增殖和炎症反应,从而导致了疾病晚期盆腔的广泛黏连。
总之,本试验推测FGF2参与了EMs的发生、发展过程,对阐明子宫内膜异位症的血管发生机制有重要意义,有望为EMs的诊断、治疗及其预后提供一种新方法。