环孢素(
Cyclosporine),又称环孢素A,是中性环状多肽,由11种氨基酸组成,它选择性地抑制辅助淋巴细胞,阻断参与排斥反应的体液和细胞效应机制,防止排斥反应的发生,同时环孢素还具有不影响吞噬细胞的功能,不产生明显骨髓抑制的优点,是公认的抗
器官移植排斥反应最为安全有效的药物。环孢素软胶囊是环孢素的一个新剂型,其最大优点是服用方便,现已广泛应用于临床。环孢素软胶囊口服吸收不规则、不完全,且不同个体的差异较大,不同的制剂在药代动力学方面可能存在很大差别,因而对比不同制剂的生物等效性对于临床合理用药有很大意义。本文通过HPLC法测定环孢素软胶囊在人体的生物利用度和生物等效性,为临床制定合理用药方案提供依据。
试验制剂:环孢素软胶囊(受试制剂:北京双鹭药业股份有限公司,参比试剂:丽珠集团丽珠制药厂);环孢素对照品(中国生物药品检定所,批号0110041,纯度99.5%);内标:环孢素D(福建生物药品检定所,批号01.04006.416,纯度99.0%);乙腈(色谱纯,北京迪马公司),其余试剂均为分析纯;空白全血由解放军307医院血液科提供。
临床方案:受试者选择本次试验选择男性健康受试者18名,平均年龄为(33.8±3.37)岁,平均身高为(170±0.04)cm,平均体重为(63.5±4.32)kg。血常规、尿常规、肝功能、肾功能、血压、心电图及胸透等检查未发现异常。受试前两周及试验期间不服用任何其他药物。本试验经医学伦理委员会审查批准。实验前本课题负责人向受试者说明试验目的、药物特性、临床应用及主要不良反应等,由本人签署知情同意书,并于试验前1 d住院。
给药方案与血样采集本试验采用双周期自身随机交叉试验设计。18名受试者随机分为A、B两组,每组9人,每组受试者每次试验时分别服用受试或参比制剂。受试者于禁食不禁水12 h后分别空腹口服北京双鹭药业股份有限公司与丽珠集团丽珠制药厂所研制的环孢素软胶囊300 mg,以200 mL温开水送服,并作记录,服药2 h后可自由饮水,服药4 h后进统一标准餐。试验前后48 h内不得饮酒。两次用药间清洗期为7 d。分别于给药前及给药后0.5,1,1.5,2,2.5,3,3.5,4,6,8,12,24 h采静脉血5 mL,肝素抗凝,于—20℃ 保存备用。
数据分析:方法专属性空白血浆(A)、空白血浆加200mg环孢素标准溶液和环孢素D溶液(B)、空白全血加环孢素和环孢素、健康受试者口服受试制剂(D)后的色谱见图1。内源性杂质无干扰,内标响应稳定。
数据处理:用中国药理学会数学药理委员会3P97药代动力学程序软件,对各受试者血药浓度实测数据进行曲线拟合,并计算药代动力学参数,以梯形面积法计算AUC 为试验的实测值。
目前以HPLC测定血清中环孢素的方法文献已有报道 ,本实验旨在通过HPLC法评价2种环孢素胶囊的生物利用度和生物等效性。实验结果表明,血药浓度.时间曲线极其相似,对受试制剂与参比制剂药动学参数AUC进行单因素方差分析及双单侧t检验,两制剂在处方和周期间无显著性差异(P>0.05),符合生物等效的假说,证明两制剂为生物等效制剂,说明北京双鹭药业股份有限公司与丽珠集团丽珠制药厂所研制的环孢素软胶囊在给药方案相同的情况下,可产生相同的治疗效果,可以互替使用,为临床制定合理用药方案提供了实验依据。
本试验采用高效液相色谱测定法,在选用的色谱条件下,环孢素与内标可完全分离,峰形对称性好,且不受内源性杂质的干扰。该法简便快速、回收率高且结果重现性好,完全可以满足环孢素血药浓度测定的需要。在18名受试者中,试验结束后检查有1例受试者谷丙转氨酶有所升高,7 d后复查恢复到正常范围之内,为一过性升高。其他受试者无不良反应发生,检查指标未见异常,表明环孢素软胶囊在试验剂量下具有较好的安全性。
(本文节选自《环孢素软胶囊在健康人体生物等效性研究》)