来氟米特片是一种新型的异嗯唑类抗
类风湿性
关节炎药物,它的免疫调节机制是抑制炎性细胞附着于内皮,抑制酪氨酸磷酸化及嘧啶核苷酸的合成,从而抑制淋巴细胞附着和B细胞增殖,阻止炎症向未病变关节转移;它可有效地控制疾病的发展,阻止骨质破坏,改善病人的生活质量,不良反应少而轻 。来氟米特片于1998年l2月在美国首次上市,2000年1月在英国上市,目前在我国福建省以一类新药申报。来氟米特片原料的含量测定方法已有文献报道。本文则采用HPLC法进行了来氟米特片的含量测定。
来氟米特对照品(经HPLC检测,其纯度为99.7% ,上海第二军医大学药学院提供);来氟米特片(批号030701、030702、030703,福建汇天生物药业有限公司);乙腈、甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。
样品溶液的制备:取来氟米特片20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于来氟米特10 mg),置50 mL量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,作为样品溶液。
精密称取来氟米特对照品,用适量甲醇溶解,用流动相进一步稀释成不同浓度的来氟米特系列溶液,并按上述色谱条件测定,记录色谱图,同时对色谱系统进行基线检测。按信噪比S/N=3,测得来氟米特的检测限浓度为0.25 ng/mL;按信噪比S/N=10,测得定量限浓度为0.83 ng/mL。
精密称取来氟米特对照品0.25282 g,置250 mL量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,记录色谱图,以对照品浓度C(vg/mL)为横坐标,峰面积A为
纵坐标,进行线性回归,得回归方程:A=72675C+403.6,r=0.9997,表明来氟米特浓度在60~504 vg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。
精密称取已测知来氟米特含量的030701批号样品细粉适量(约含来氟米特5 mg),共9份,取3份分别加入上述对照品储备液各15.0 mL,另取3份分别加入上述对照品储备液各20.0 mL,剩余的3份再分别加入上述对照品储备液各25.0 mL,分别用流动相稀释至50 mL,按上述色谱方法测定,计算回收
本文所用流动相中有机相比例加大,使色谱中来氟米特出峰时间提前,峰形改善,缩短了分析时间。
原质量标准中要求含量测定方法采用分光光度法,但与分光光度法相比,用HPLC法测定来氟米特片的含量不仅精密度高、重现性好,且专属性强。本文中测定的3批样品曾同时用分光光度法测定其含量,分别为102.3% 、101.3%和100.8% ,比用HPLC法测定结果均高了约2% ~3% ,说明用本文的方法测定药品含量专属性强、准确度高,尤其是杂质或辅料对检测有干扰的样品采用该方法检测更佳。
来氟米特片药理毒理: 来氟米特片为一个具有抗增殖活性的异口恶 唑类免疫抑制剂,其作用机理主要是抑制二氢乳清酸脱氢酶的活性,从而影响活化淋巴细胞的嘧啶合成。体内外试验表明本品具有抗炎作用。来氟米特片的体内活性主要通过其活性代谢产物 A771726(M1)而产生。
(本文节选自《HPLC法测定来氟米特片含量》)