益视由党参、当归、五味子(蒸)等l4味中药经加工制成,具有滋肾养肝、键脾益气、调节视力的功能;
益视颗粒用于肾肝不足、气血亏虚引起的青少年
近视及视力疲劳。方中党参,当归,五味子,制何首乌,厚朴(姜制)等用量大,为主要药味。原标准没有含量测定项。为了有效控制益视颗粒的质量,保证临床疗效,作者对益视颗粒剂进行含量测定研究,采用新的测定波长及益视颗粒样品制备法,具有操作简便、回收率高、杂质干扰少的优点。
仪器与试药:高效液相色谱仪(大连依利特P200 11高压恒流泵、大连依利特UV200 11紫外可变波长检测器、千谱色谱工作站),Hypersil BDS Cl8色谱柱(4.6 intn×2O0intn,5 tan);厚朴酚对照品(中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号o729.98cI5);益视颗粒剂由江西聚仁堂药业股份有限责任公司提供;流动相所用溶剂为色谱纯,其他试剂为分析纯。
阴性样品的制备按处方比例制备缺厚朴药材颗粒,照样品制备方法制备阴性对照样品。
精密度试验取供试品溶液和对照品溶液,分别重复进样6次测定峰面积,计算原朴酚峰面积的RSD。结果对照品RSD 1.0%;供试品RSD0.77%。
稳定性试验取供试品溶液和对照品溶液,在0,l,2,3,6,12 h分别测定峰面积。结果表明供试品溶液厚朴酚峰面积RSD 0.81%;对照品溶液峰面积RSD 1.42%,说明对照品溶液和样品溶液在12 h内较稳定。
重复性试验取相同批号的益视颗粒约5 g,6份,精密称定,依法测定,计算。结果RSD 0.47%。
益视颗粒样品测定依法对厂家提供的多批样品进行厚朴酚含量测定,结果见表2。根据10个批号的样品含量测定结果,暂定本品每袋含厚朴(姜制)以厚朴酚计不得少于0.4 nag。
磷酸溶液(73.5:26.5)为流动相,供试品中的厚朴酚能与其他杂质峰达基线分离,分离度大于1.5。
提取溶剂的选择益视颗粒剂水溶性强,易吸潮,因此先用水将其溶解,再用有机溶剂萃取,作者曾试用了石油醚、乙醚、醋酸乙酯、氯仿等萃取溶剂,结果氯仿萃取液厚朴酚含量最高。
纯化溶剂的选择氯仿萃取液中杂质多,对色谱柱损伤大。作者曾采用了不同的溶剂(水,10%甲醇,30% 甲醇,50% 甲醇)纯化氯仿萃取液,结果30%甲醇溶液处理,杂质除去多且厚朴酚损失最少,因此用30%甲醇纯化,并用氯仿回洗。
(本文节选自《HPLC测定益视颗粒剂厚朴酚含量》)